文章目录

1 材料与方法

1.1 材料

    1.1.1 动物

    1.1.2 药物与试剂

    1.1.3 仪器

1.2 方法

    1.2.1 睡眠干扰对小鼠骨骼增长及对5-HT2A受体表达与血清GH的影响

    1.2.2 睡眠干扰对大鼠觉醒期、慢波睡眠、异相睡眠及总睡眠时长的影响

    1.2.3 睡眠干扰抑制骨骼增长小鼠与正常小鼠脑组织差异表达miRNA的筛选

    1.2.4 利用RnaDB网站预测所有调节5-HT2A受体的miRNA

    1.2.5 以5-HT2A受体为靶基因的miRNA的qRT-PCR验证

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 睡眠干扰对小鼠体长的影响

2.2 睡眠干扰对脑组织5-HT2A受体的影响

2.3 睡眠干扰对血清GH的影响

2.4 睡眠干扰对大鼠觉醒期、慢波睡眠、异相睡眠及总睡眠时长的影响

2.5 睡眠干扰抑制骨骼增长的小鼠与普通小鼠脑组织差异表达miRNA的筛选

2.6 利用RnaDB网站考查筛选的miRNA与5-HT2A受体结合能力

2.7 以5-HT2A受体为靶基因的miRNA的qRT-PCR验证

3 讨论

文章摘要:目的:研究5-羟色胺2A受体在睡眠干扰中抑制动物骨骼增长的作用并筛选靶向5-羟色胺2A受体调控其表达的miRNA。方法:通过对小鼠进行睡眠干扰，观察其对小鼠体长增长、5-羟色胺2A受体表达、生长激素分泌的影响；同时通过对大鼠进行睡眠干扰，测量其对大鼠慢波睡眠、异相睡眠等各类型睡眠时长的影响；采用芯片法筛选睡眠干扰后引起小鼠体长差异表达的miRNA,利用RnaDB网站筛选调节5-羟色胺2A受体表达的miRNA,对得到的两组miRNA进行比较，得到重合的miRNA并进行qRT-PCR验证，从而筛选出通过对睡眠干扰引起5-羟色胺2A受体高表达抑制动物骨骼增长的miRNA。结果:睡眠干扰20 d后，明显抑制小鼠体长增长，同时显著增加小鼠脑组织5-羟色胺2A受体表达，降低体内生长激素分泌，与空白对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。同时，睡眠干扰能明显减少大鼠慢波睡眠和总睡眠时长（P<0.05）,但在异相睡眠时长上无明显影响（P>0.05）。在miRNA筛选研究方面，芯片法共获得16个符合差异倍数的miRNA,其中表达上调13个，表达下调3个，利用RnaDH网站筛选与芯片法筛选重合的miRNA为miR-200c-3p,对其进行qRT-PCR法验证结果显示其确能引起睡眠干扰组与空白对照组差异表达，因此miR-200c-3p可能为睡眠干扰引起5-羟色胺2A受体高表达进而抑制动物骨骼增长的核心靶点之一。结论:睡眠干扰能够抑制动物骨骼增长，其机制可能与睡眠干扰引起5-羟色胺2A受体高表达，导致慢波睡眠减少，从而降低生长激素分泌有关，通过miRNA筛选及qRT-PCR验证显示，miR-200c-3p可能是其核心靶点之一。

文章关键词:

论文分类号:R336

文章来源：《世界睡眠医学杂志》 网址: http://www.sjsmyxzz.cn/qikandaodu/2022/0405/1969.html